Invest Ophthalmol Vis Sci
. 2008 Nisan; 49 (4): 1712-20.
doi: 10.1167 / iovs.07-0477.
Quercetin’in in vitro insan RPE’sinde oksidatif strese karşı koruyucu etkisi
Daniel Kook 1, Armin H Kurt , Alice L Yu , Aljoscha S Neubauer , Siegfried G Priglinger , Anselm Kampik , Ulrich C Welge-Lüssen
Bağlantılar genişlet
- PMID: 18385095
- DOI: 1167 / iovs.07-0477
Öz
Amaç: Diyetteki antioksidan kuersetinin yaşa bağlı makula dejenerasyonunda (AMD) ortaya çıkan retina pigment epitel (RPE) hücre disfonksiyonu ve hücresel yaşlanma üzerindeki olası koruyucu etkisini araştırmak. Ana flavonoid kuersetin, in vitro RPE hücreleri üzerinde çalışıldı.
Yöntemler: Kültürlenmiş insan RPE hücreleri, 24 saat boyunca farklı kuersetin konsantrasyonları ile inkübe edildi. Hücreler daha sonra 2 saat 150 ila 300 mikroM hidrojen peroksit ile muamele edildi. Mitokondriyal fonksiyon MTT testi kullanılarak ve hücre canlılığı canlı ölü boyama testi ile ölçüldü. Hücre içi glutatyon seviyeleri, bir glutatyon deney kiti kullanılarak belirlendi. Apoptoz, bir kaspaz-3 deneyi ile ölçüldü ve hücresel yaşlanma, beta-galaktosidaz boyama ile ölçüldü. Yaşlanma ile ilişkili transmembran proteini caveolin-1’in ekspresyonu, Northern ve Western blot analizleri ile araştırıldı.
Sonuçlar: Hidrojen peroksit tedavisi, mitokondriyal fonksiyonda (% 52) ve hücre canlılığında (% 71) önemli düşüşlere neden olurken, 50 mikroM kuersetin ile ön inkübasyon bu azalmayı doza bağlı bir şekilde azaltmıştır. Quercetin tedavisi, kullanılan quercetin konsantrasyonlarında hücre içi glutatyon seviyeleri üzerinde kayda değer bir etki göstermedi. Kaspaz-3’ün hidrojen peroksit ile indüklenen aktivasyonu, muamele edilmemiş kontrol ile karşılaştırıldığında (P <0.001), 50 mikroM kuersetin ile 1.9’dan 1.4 kata düşürüldü. Hidrojen peroksit, beta-galaktosidaz pozitif hücrelerde büyük bir (>% 90) doza bağlı artışa neden olurken, muamele edilmeyen kontrolde sadece tek hücreler bu enzimi ifade etti (<% 5). Hücresel yaşlanmadaki bu artış, doza bağımlı bir şekilde kuersetin tarafından önemli ölçüde zayıflatıldı. En yüksek zayıflamaya 50 mikroM quercetin’de ulaşıldı. Quercetin, hidrojen peroksit ile tedaviden 48 saat sonra caveolin-1 mRNA’da doza bağlı önemli bir azalmaya neden oldu. 96 saatlik inkübasyondan sonra, caveolin-1 protein seviyeleri de azaldı.
Sonuçlar: Veriler, quercetin’in, RPE hücrelerini oksidatif hasardan ve in vitro hücresel yaşlanmadan doza bağımlı bir şekilde koruyabildiğini göstermektedir. Yazarlar, antioksidatif kapasitedeki bu artışın – hücre içi redoks durumu gibi diğer mekanizmaların yanı sıra – aynı zamanda caveolin-1’in yukarı regülasyonunu inhibe ederek aracılık ettiğini öne sürüyorlar. Kaveolin-1’in aşağı regülasyonu, AMD’nin erken patogenezinde yer alan bir durum olan hücresel strese yanıt olarak apoptotik hücre ölümünü önlemek için retina pigment epitelyumu için önemli olabilir. Bu nedenle yazarlar, quercetin gibi antioksidan diyet flavonoidlerinin kullanımının erken AMD’nin önlenmesinde umut verici bir yaklaşım olduğuna inanıyorlar.